La tècnica d’assaig d’immunoabsorció enzimàtica enllaçada (en anglès Enzyme-Linked Immuno Assay) o prova ELISA és una prova immunològica que permet la detecció o assaig de molècules en una mostra biològica. Va ser conceptualitzat i desenvolupat per dos científics suecs, Peter Perlmann i Eva Engvall, a la Universitat d’Estocolm el 1971.

Les molècules analitzades pel mètode ELISA són generalment proteïnes. I els tipus de mostres inclouen materials biològics fluids (plasma, sèrum, orina, transpirants), medis de cultiu cel·lular o proteïna recombinant produïda per una cèl·lula el material genètic de la qual ha estat alterat per recombinació genètica, purificada en solució.

La prova ELISA s’utilitza principalment en immunologia per detectar i / o mesurar la presència de proteïnes, anticossos o antígens en una mostra. Aquesta prova serològica detecta en particular els anticossos produïts pel cos en resposta a la contaminació viral.

L’ús d’anticossos per al diagnòstic de malalties infeccioses representa un mètode específic i ràpid. La tècnica ELISA és una tècnica immuno-enzimàtica que permet visualitzar, a partir d’una mostra biològica, les reaccions entre un antigen (un cos considerat estrany per l’organisme viu) i un anticòs mitjançant una reacció de color produïda per un marcador enzimàtic. generalment fosfatasa i peroxidasa alcalines - prèviament unides a l’anticòs. La reacció del color confirma la identificació del bacteri aïllat o la presència del virus desitjat i la intensitat del color dóna una indicació de la quantitat d’antígens o anticossos en la mostra donada.

Hi ha quatre tipus principals de proves ELISA:

• ELISA directe, permet detectar o mesurar anticossos. Només utilitza un anticòs primari;
• ELISA indirecta, el més utilitzat, també permet detectar o assajar anticossos. Utilitza un anticòs secundari que li proporciona una sensibilitat millor que l’ELISA directe;
• ELISA en competició, permet la dosificació d’antígens. Produït per la competència per obtenir enllaços, no utilitza cap enzim;
• ELISA «en sandvitx», permet la dosificació d’antígens. Aquesta tècnica s’utilitza habitualment en investigacions.

La prova ELISA s’utilitza per:

• Trobar i mesurar anticossos en serologia per al diagnòstic de malalties infeccioses: virologia, parasitologia, bacteriologia, etc .;
• Dosi de proteïnes a baixes concentracions: dosis específiques de determinades proteïnes plasmàtiques (immunoglobulina E (IgE), ferritina, hormones proteiques, etc.), marcadors tumorals, etc.;
• Dosi molècules petites: hormones esteroides, hormones tiroïdals, medicaments ...

La prova ELISA s’utilitza en particular per diagnosticar moltes malalties infeccioses:

Malalties de transmissió sexual (ETS)

Incloent hepatitis, sífilis, clamídia i VIH. Recomanat per les autoritats sanitàries, és el principal test de detecció de la sida: mostra la presència d’anticossos anti-VIH i l’antigen p24 sis setmanes després de la infecció.

Malalties regionals o endèmiques

Febre groga, malaltia del virus Marburg (MVM), Ladengue, malaltia de Lyme, Chikungunya, febre de la vall del Rift, èbola, febre de Lassa, etc.

El Covid-19

Per realitzar-se més de 2 a 3 setmanes després de l'aparició dels símptomes, la prova ELISA permet identificar, en menys d'una hora, la presència d'anticossos anti-SARS-CoV-2.

Patògens vírics que causen infeccions prenatals

Toxoplasmosi, rubèola, citomegalovirus, herpes simple per exemple.

Altres casos

Però també ha trobat aplicacions en detecció:

• Embarassos;
• Malalties autoimmunes;
• Al·lergògens alimentaris: la determinació quantitativa de les immunoglobulines E (IgE) totals ajuda a l'avaluació i tractament de les al·lèrgies;
• Alteracions hormonals;
• Marcadors tumorals;
• Virus vegetals;
• I molts més

Com a part de la detecció d’anticossos anti-SARS-CoV-2, un estudi pilot dut a terme a l’agost de 2020 per l’Institut Pasteur, el CNRS, l’Inserm i la Universitat de París confirma la fiabilitat de la prova ELISA: ambdues proves ELISA utilitzen la prova tota la proteïna N de SARS-CoV-2 (ELISA N) o el domini extracel·lular de l'espiga de virus (S) com a antígens diana. Aquesta tècnica permetria identificar anticossos en més del 90% dels casos, amb una taxa de falsos positius molt baixa de l’1%.

Realitzades en laboratoris d’anàlisi amb recepta mèdica, les proves d’Elisa costen uns 10 euros i són reemborsades al 100% per l’assegurança mèdica.

Realitzats en centres gratuïts d’informació, detecció i diagnòstic (CeGIDD), poden ser gratuïts per al VIH i el SARS-CoV-2.